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選用AP標(biāo)記抗體稀釋液需要考慮哪些問題

AP標(biāo)記抗體稀釋液適用于免疫組織化學(xué)與免疫印跡等實(shí)驗(yàn)中AP標(biāo)記抗體的稀釋。稀釋液中添加了抗體保護(hù)劑和穩(wěn)定劑等成分，有效增加了稀釋后AP標(biāo)記抗體的穩(wěn)定性。傳統(tǒng)的抗體稀釋液常用的有：脫脂奶粉、TBST、PBST、BSA、市售的抗體稀釋液。在選擇抗體稀釋液需要注意的問題有哪些呢？1、脫脂奶粉不能用于磷酸化蛋白，保存時(shí)間短，顏色變綠，要更換新的抗體，昂貴的抗體不建議使用。2、PBST不能用來稀釋堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的抗體，含AP標(biāo)記的二抗不能使用PBST稀釋。3、抗BSA的抗體不能...

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GUS染色液的染色原理

GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些細(xì)菌基因組內(nèi)的編碼β-葡萄糖苷酸酶的一種水解酶，該基因常作為融合標(biāo)記用于植物轉(zhuǎn)基因分析和調(diào)控研究中。GUS染色的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菍χ参飿颖具M(jìn)行染色，因?yàn)榻^大多數(shù)植物細(xì)胞內(nèi)不存在內(nèi)源GUS活性，因此GUS基因廣泛用作轉(zhuǎn)基因植物的報(bào)告基因。GUS染色液是β-葡萄糖苷酶基因染色試劑盒(β-GalactosidaseReporterGeneStainingKit)的簡稱。GUS染色液染色原理是適宜的反應(yīng)條件下，β-葡萄糖...

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SOC液體培養(yǎng)基與SOB培養(yǎng)基有哪些區(qū)別？

SOC液體培養(yǎng)基是分子生物學(xué)常用的大腸桿菌培養(yǎng)基，與LB培養(yǎng)基相比，SOC培養(yǎng)基中含有兩倍多蛋白胨，蛋白胨中富含氨基酸及多肽。另外，SOC培養(yǎng)基中含有鎂離子，鎂離子是高密度培養(yǎng)必須的離子。利用培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌在普通條件（250rpm）下?lián)u瓶培養(yǎng)，菌濃可達(dá)到OD6003-5左右，如果提高轉(zhuǎn)速到350rpm，OD600能夠達(dá)到10-15。那么SOC培養(yǎng)基與SOB培養(yǎng)基有什么區(qū)別呢？SOB培養(yǎng)基配方如下：2.0%胰蛋白胨、0.5%酵母提取物、10mM氯化鈉、2.5mM氯化鉀、10...

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揭開蛋白Marker試劑的神秘面紗

蛋白Marker試劑是一些純化較好的蛋白混合物，通過與染料共價(jià)偶聯(lián)，在電泳過程中或者轉(zhuǎn)膜時(shí)可以直接觀察到。預(yù)染Marker的出現(xiàn)方便了我們的實(shí)驗(yàn)，這種蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)可以幫助我們在電泳時(shí)，電泳后，以及轉(zhuǎn)膜后檢測電泳情況和估計(jì)遷移率。本產(chǎn)品由跨度從10~180kDa的10種純化的天然蛋白混合而成，各條帶濃度約為0.2~0.4mg/ml。其中70kD條帶為橙色，10kD為藍(lán)色和黃色條帶混合物，其余條帶為藍(lán)色，10kD條帶在15%以下膠濃度時(shí)10kD為深綠色。蛋白Marker試劑適合...

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從基本理論認(rèn)識人抗胰蛋白酶elisa試劑盒

人抗胰蛋白酶elisa試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中重組胰蛋白酶水平。用純化的重組胰蛋白酶抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入重豬胰蛋白酶，再與HRP標(biāo)記的重豬胰蛋白酶抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成...

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細(xì)胞好不好？那試試細(xì)胞檢測試劑盒吧！

在實(shí)驗(yàn)研究中用得比較多的是什么呢？有人覺得是病毒，有人想到了質(zhì)粒，也有人腦海里浮現(xiàn)出了某種動(dòng)物：小鼠、大鼠…但是，無論怎樣，都必然繞不開常用的細(xì)胞，它可以說是生物實(shí)驗(yàn)研究的道路上親密的伙伴。但是這個(gè)伙伴可不太好伺候，即使我們自己廢寢忘食、挨餓受凍地做著科研，也一定要給這位小伙伴*適宜的條件。不過呢，縱使我們煞費(fèi)苦心地為它提供優(yōu)渥的生長壞境，然而很多時(shí)候?qū)嶒?yàn)效果仍然不理想。有什么辦法可以檢測細(xì)胞活力情況呢？使用細(xì)胞檢測試劑保護(hù)好“科研小伙伴”，方可確?？蒲械臏?zhǔn)確性！細(xì)胞活力檢測...

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剛采購的實(shí)驗(yàn)室耗材如何質(zhì)檢和驗(yàn)收

在實(shí)驗(yàn)室的裝備和用品的采購中，難采購的就是各類耗材。這些實(shí)驗(yàn)室耗材的價(jià)值雖然沒有精密儀器高，但對實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行起著*的作用。那么實(shí)驗(yàn)室該如何對采購的耗材進(jìn)行驗(yàn)收和質(zhì)檢呢？一、實(shí)驗(yàn)室耗材的檢收：1、外包裝檢查：包裝應(yīng)完整無損無污，標(biāo)識清楚——廠家名稱，品名，批準(zhǔn)文號，生產(chǎn)日期，有效期等。2、內(nèi)包裝檢查：內(nèi)包裝是否有破損，泄漏，內(nèi)容物是否齊全，是否有相應(yīng)的使用說明書等。3、上述檢查在到貨時(shí)完成，同時(shí)進(jìn)行記錄：分類存放于試劑儲備區(qū)。二、質(zhì)檢程序（以檢測離心管為例）：1、檢測離心管目測：...

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三個(gè)細(xì)節(jié)幫助你避免核酸提取失敗

面對紛繁復(fù)雜的樣本，每天的核酸提取可以說是費(fèi)時(shí)費(fèi)力。如果短時(shí)間內(nèi)想穩(wěn)定拿到實(shí)驗(yàn)結(jié)果，那么快速、穩(wěn)定的提取方法就顯得十分重要。提取過程中需要注意的細(xì)節(jié)較多，一處出錯(cuò)都會(huì)導(dǎo)致結(jié)果的失敗。常見的問題主要有產(chǎn)物得率低，產(chǎn)物降解或者試劑殘留。針對這些問題，下文整理給出了具體的應(yīng)對方法，幫助大家避坑。一、提取的核酸得率低1、樣品量與試劑的配比要控制在一定范圍，避免超過裂解能力；2、破碎研磨的步驟處理細(xì)節(jié)很重要，一定要充分研磨，這是核酸提取的首要條件；3、在洗脫的步驟，使用足量的洗脫液洗脫...

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