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研盒優(yōu)薦|流式試劑盒?一鍵解析細(xì)胞亞群

更新時(shí)間:2026-07-28點(diǎn)擊次數(shù):333

研盒優(yōu)薦

流式試劑盒•

一鍵解析細(xì)胞亞群

SFCMZ-007 Mouse T-Subset Flow Kit

(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE)

基礎(chǔ)介紹

流式細(xì)胞術(shù)(FCM),以流式細(xì)胞儀為檢測工具,對懸液中的單細(xì)胞或其他生物粒子,結(jié)合免疫標(biāo)記(偶聯(lián)熒光素抗體)、光電轉(zhuǎn)換等技術(shù),實(shí)現(xiàn)高速、逐一的細(xì)胞定量分析和分選的技術(shù)。在生命科學(xué)研究領(lǐng)域,細(xì)胞群體的精準(zhǔn)分型與功能解析是探究疾病發(fā)生機(jī)制、評估免疫狀態(tài)的核心環(huán)節(jié)。流式細(xì)胞術(shù)憑借其高靈敏度、多參數(shù)同步檢測及單細(xì)胞分析能力,已成為細(xì)胞表型分析的關(guān)鍵技術(shù)。

T淋巴細(xì)胞(T lymphocyte)簡稱T細(xì)胞,來源于骨髓的多能干細(xì)胞,在胸腺中分化、發(fā)育成熟后,通過淋巴和血液循環(huán)而分布到全身的免疫器官和組織中發(fā)揮免疫功能。T細(xì)胞是一類關(guān)鍵的免疫細(xì)胞,主要根據(jù)其表面分子和功能分類。最常見的是CD4+ T細(xì)胞(輔助T細(xì)胞,調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答)和CD8+ T細(xì)胞(細(xì)胞毒性T細(xì)胞,直接殺傷感染細(xì)胞)。此外,還包括調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(抑制免疫反應(yīng))、記憶T細(xì)胞(長期免疫記憶)、γδ T細(xì)胞(固有免疫樣功能)等亞群,共同協(xié)調(diào)適應(yīng)性免疫防御。

標(biāo)志物:CD3e

表達(dá)細(xì)胞范圍:所有成熟T細(xì)胞(胸腺細(xì)胞除外)

核心作用:構(gòu)成TCR-CD3復(fù)合物,傳遞T細(xì)胞活化信號(hào)

免疫檢測作用:判定總T細(xì)胞

標(biāo)志物:CD4

表達(dá)細(xì)胞范圍:輔助性T細(xì)胞、調(diào)節(jié)性T細(xì)胞等

核心作用:結(jié)合MHC Ⅱ類分子,輔助T細(xì)胞活化,調(diào)控免疫應(yīng)答

免疫檢測作用:判定輔助性T細(xì)胞亞群

標(biāo)志物:CD8α

表達(dá)細(xì)胞范圍:細(xì)胞毒性T細(xì)胞、部分記憶T細(xì)胞

核心作用:結(jié)合MHC Ⅰ類分子,介導(dǎo)CTL殺傷靶細(xì)胞

免疫檢測作用:判定細(xì)胞毒性T細(xì)胞亞群

試劑盒三維數(shù)據(jù)卡

名稱

Mouse T-Subset Flow Kit

(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE))

貨號(hào)

SFCMZ-007

規(guī)格

25T/50T/100T

交叉反應(yīng)

Mouse

應(yīng)用

FCM

 

|試劑盒組分|

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

100T/

50T/25T

推薦

使用量

SFCMZ-007A

Anti-CD3e(FITC)

Monoclonal Antibody

1mL/

0.5mL/0.25mL

10μL/T

SFCMZ-007B

Anti-CD4(APC)

Monoclonal Antibody

1mL/

0.5mL/0.25mL

10μL/T

SFCMZ-007C

Anti-CD8a(PE)

Monoclonal Antibody

1mL/

0.5mL/0.25mL

10μL/T

SFCMZ-007D

Anti-Armenian Hamster IgG Isotype Control(FITC) Monoclonal Antibody

0.1mL/

0.1mL/0.1mL

10μL/T

SFCMZ-007E

Anti-Rat IgG2b Isotype Control(APC) Monoclonal Antibody

0.1mL/

0.1mL/0.1mL

10μL/T

SFCMZ-007F

Anti-Rat IgG2a Isotype Control(PE) Monoclonal Antibody

0.1mL/

0.1mL/0.1mL

10μL/T

 

實(shí)驗(yàn)相關(guān)

01

實(shí)驗(yàn)流程(僅供參考)

1

取100 μL EDTA抗凝外周血,加到5 mL流式檢測管底部;

2

加入2 mL 1×紅細(xì)胞裂解液(推薦貨號(hào):R1010,紅細(xì)胞裂解液),混勻后冰上孵育10 min,以裂解紅細(xì)胞(觀察溶液由鮮紅色變?yōu)橥噶?,說明紅細(xì)胞裂解完-全);

3

加入3 mL染色緩沖液(推薦貨號(hào):CA2490,流式染色緩沖液)混勻,終止裂解;將樣本管以1000 rpm離心5 min,棄去上清液;

4

加入2 mL染色緩沖液重懸細(xì)胞,以1000 rpm離心5 min,棄去上清液;

5

加入60 μL染色緩沖液,依次加入CD3-FITC, CD8α-PE, CD45-PerCP, CD4-APC 各10 μL檢測抗體(每1×106個(gè)細(xì)胞),混勻,室溫避光孵育20 min;

(注:根據(jù)待加入抗體量調(diào)整染色緩沖液的體積,使總體積為100 μL。例如,待加入10 μL檢測抗體,則需加入90 μL染色緩沖液。)

6

加入2 mL染色緩沖液,以1000 rpm離心5 min,棄去上清液;

7

加入0.5 mL染色緩沖液重懸細(xì)胞,進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測(若不能立即上機(jī),可加入固定液后于4℃避光保存,建議24小時(shí)內(nèi)上機(jī))。

 

02

結(jié)果判定圖

03

實(shí)驗(yàn)圖片

Flow Cytometry analysis of Single-cell suspension from mouse spleen stained with Mouse T-Subset Flow Kit(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE), FSC-A.

Flow Cytometry analysis of Single-cell suspension from mouse spleen stained with Mouse T-Subset Flow Kit(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE), Comp-FITC CD3.

Flow Cytometry analysis of Single-cell suspension from mouse spleen stained with Mouse T-Subset Flow Kit(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE), Comp-FITC CD3.

Flow Cytometry analysis of Single-cell suspension from mouse spleen stained with Mouse T-Subset Flow Kit(CD3e FITC/CD4 APC/CD8α PE), Comp-FITC CD3.

 

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品名稱

R1010

紅細(xì)胞裂解液

CA2490

流式染色緩沖液

P1020

1×PBS緩沖液(pH7.2- 7.4)

CA2450

流式細(xì)胞固定液

CA2461

流式細(xì)胞通透劑(Triton X-100)

P8610

人外周血淋巴細(xì)胞分離液

F8210

白色細(xì)胞過濾器 70μm

F8200

紫色細(xì)胞過濾器 40μm

F8190

黃色細(xì)胞過濾器 100μm


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