羥自由基清
除能力檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法
貨號(hào)：BC1325
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致，有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

溶液的配制：

1. 試劑四：試劑放于試劑瓶?jī)?nèi)EP管中。臨用前加入9.84 mL蒸餾水混勻，也可按比例現(xiàn)用現(xiàn)配，配好的試劑2-8℃保存4周。

產(chǎn)品說(shuō)明：
羥自由基是人體在新陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生的對(duì)生物體毒性強(qiáng)、危害大的一種自由基。它可以使組織中的糖類、氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸等物質(zhì)發(fā)生氧化，遭受氧化性損傷和破壞，導(dǎo)致細(xì)胞壞死或突變。羥自由基清除能力是樣本抗氧化能力的重要指標(biāo)之一，在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。
H₂O₂/Fe²⁺通過(guò)Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基，將鄰二氮菲-Fe²⁺水溶液中Fe²⁺氧化為Fe³⁺，導(dǎo)致536nm的吸光度下降，樣本536nm吸光度下降速率的抑制程度，反映了樣本清除羥自由基的能力。

注意：實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、低溫離心機(jī)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：具體操作步驟詳見(jiàn)“產(chǎn)品資料"附件
注意事項(xiàng):

1. 為了比較不同樣本羥自由基清除能力，對(duì)于同一批樣本必須加入等量的樣本，血清、組織勻漿、果汁等液體樣本加入同樣體積，提取物（或者藥物）配制成同樣濃度。

2. 樣本過(guò)多時(shí)，可以按體積比試劑一：試劑二：試劑三=0.05：0.1：0.1的比例配制工作液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例：

1. 取0.1g脾臟加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算：羥自由基清除率D%=（A測(cè)-A對(duì)）÷（A空-A對(duì)）×100%=(0.77-0.222)÷(0.884-0.222)×100%=82.78%。

2. 取0.1g稗草葉加入1mL提取液進(jìn)行勻漿研磨，取上清后按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算：羥自由基清除率D%=（A測(cè)-A對(duì)）÷（A空-A對(duì)）×100%=(0.698-0.222)÷(0.884-0.222)×100%=71.9%。

3. 取兔血清后按照測(cè)定步驟操作，用96孔板測(cè)得計(jì)算：羥自由基清除率D%=（A測(cè)-A對(duì)）÷（A空-A對(duì)）×100%=(0.553-0.222)÷(0.884-0.222)×100%=50%。

相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn)：

1. Hu J, Wang Q, Wang Y, et al. Polydopamine-Based Surface Modification of Hemoglobin Particles for Stability Enhancement of Oxygen Carriers[J]. Journal of Colloid and Interface Science, 2020.

2. Liang R, Zhao J, Li B, et al. Implantable and degradable antioxidant poly (ε-caprolactone)-lignin nanofiber membrane for effective osteoarthritis treatment[J]. Biomaterials, 2020, 230: 119601.

3. Yang Y, Liu M, Wang K, et al. Chemical and cytological evaluation of honeybee pollen antioxidant ability[J]. Journal of Food Science, 2020, 85(3): 824-833.

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