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當(dāng)前位置:首頁(yè)產(chǎn)品中心生化檢測(cè)試劑盒-常量法ATP系列BC0960-50T/24SCa++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒

Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

儲(chǔ)存條件
-20℃
中文名稱
Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒
有效期
6個(gè)月
單位
盒
英文名稱
Ca++Mg++ ——ATPase Activity Assay Kit
檢測(cè)方法
可見分光光度法 Spectrophotometer
規(guī)格
50T/24S

產(chǎn)品型號(hào):BC0960-50T/24S

更新時(shí)間:2024-04-24

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪 問(wèn) 量 :2450

服務(wù)熱線

010-50973130

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產(chǎn)品介紹


Ca++Mg++-ATP酶活性檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
可見分光光度法
貨號(hào):BC0960
規(guī)格:50T/24S
產(chǎn)品組成:使用前請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)試劑體積與瓶?jī)?nèi)體積是否一致,有疑問(wèn)請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系索萊寶工作人員。

試劑名稱規(guī)格保存條件
試劑一液體30 mL×1瓶2-8℃保存
試劑二液體4 mL×1 瓶2-8℃保存
試劑三粉劑×2支-20℃保存
試劑四液體2 mL×1瓶2-8℃保存
試劑五液體3 mL×1瓶2-8℃保存
試劑六粉劑×1瓶2-8℃保存
試劑七粉劑×1瓶2-8℃保存
試劑八液體15 mL×1 瓶常溫保存
標(biāo)準(zhǔn)品液體1 mL×1支2-8℃保存

溶液的配制:

  1. 試劑三:臨用前取1支加入1 mL蒸餾水充分混勻待用;現(xiàn)用現(xiàn)配。用不完的試劑-20℃分裝保存一周。

  2. 試劑六:臨用前加入15 mL蒸餾水,溶解后2-8℃保存兩周。

  3. 試劑七:臨用前加入15 mL蒸餾水,溶解后2-8℃保存兩周。

  4. 標(biāo)準(zhǔn)品:10mmol/L 標(biāo)準(zhǔn)磷貯備液。將標(biāo)準(zhǔn)品 20倍稀釋,即取0.1 mL標(biāo)準(zhǔn)品加1.9 mL蒸餾水充分混勻,配成0.5 μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)磷應(yīng)用液,現(xiàn)用現(xiàn)配。

  5. 定磷劑的配制:按H2O:試劑六:試劑七:試劑八=2:1:1:1(體積比)的比例配制,配好的定磷劑應(yīng)為淺黃色。若無(wú)色則試劑失效,若是藍(lán)色則為磷污染,定磷劑根據(jù)樣本量現(xiàn)用現(xiàn)配。

注意:配試劑最好用新的燒杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
產(chǎn)品說(shuō)明:
Ca++Mg++-ATP酶廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中,可催化ATP水解生成ADP和無(wú)機(jī)磷。
根據(jù)Ca++Mg++-ATP酶分解ATP生成ADP及無(wú)機(jī)磷,通過(guò)測(cè)定無(wú)機(jī)磷的量來(lái)確定ATP酶活性高低。


注意:實(shí)驗(yàn)之前建議選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)。如果樣本吸光值不在測(cè)量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進(jìn)行檢測(cè)。
需自備的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、低溫離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟:具體操作步驟詳見“產(chǎn)品資料"附件

注意事項(xiàng):

  1. 由于每一個(gè)樣都必須做對(duì)照,本試劑盒50管只能測(cè)24份Ca++ Mg++-ATP酶。

  2. 此法具有微量、靈敏、快速的特點(diǎn)。所以對(duì)測(cè)定所用試管要求嚴(yán)格無(wú)磷。避免磷污染是檢測(cè)成敗的關(guān)鍵。

實(shí)驗(yàn)實(shí)例:

  1. 取0.1g胰腺加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清置冰上,按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=0.916-0.389=0.527,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=0.398-0.004=0.394,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

Ca++Mg++-ATP酶活力(U/g 質(zhì)量) =7.5×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=100.32 U/g 質(zhì)量。

  1. 取0.1g柳樹加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清置冰上,按照測(cè)定步驟操作,測(cè)得計(jì)算ΔA測(cè)定=0.137-0.124=0.013,ΔA標(biāo)準(zhǔn)=0.398-0.004=0.394,按樣本質(zhì)量計(jì)算酶活得:

Ca++Mg++-ATP酶活力(U/g 質(zhì)量) =7.5×ΔA測(cè)定÷ΔA標(biāo)準(zhǔn)÷W=2.47 U/g 質(zhì)量。
相關(guān)發(fā)表文獻(xiàn):

  1. Zhengwen Zhou,Yue Zhang,Luning Lin,et al. Apigenin suppresses the apoptosis of H9C2 rat cardiomyocytes subjected to myocardial ischemia-reperfusion injury via upregulation of the PI3K/Akt pathway. Molecular Medicine Reports. May 2018;(IF1.851)

參考文獻(xiàn):

  1. Datiles M J, Johnson E A, McCarty R E. Inhibition of the ATPase activity of the catalytic portion of ATP synthases by cationic amphiphiles[J]. Biochimica et Biophysica Acta (BBA)-Bioenergetics, 2008, 1777(4): 362-368.


相關(guān)系列產(chǎn)品:
BC0060/BC0065 Na+k+-ATP酶活性檢測(cè)試劑盒
BC0300/BC0305 ATP含量檢測(cè)試劑盒

Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒  Ca++Mg++ ——ATP酶測(cè)試盒


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